ہمارے آپریشن کے طریقے، تفصیلات، اور نظریاتی وضاحتیں آپ کے آپریشن کے لیے رہنما اصول بن جائیں گی، جیسے کہ غذائیت کے حل اور سیل فلاسکس کی جگہ کا تعین؛ نس بندی کے طریقہ کار؛ ان کے درست آپریشن کو سیکھنے کے لئے، پہلی بار ان پر توجہ دینا ضروری ہے.
بچوں کی پرورش جیسے خلیوں کی پرورش کرنا
خلیے واقعی نازک ہوتے ہیں۔ پانی کی کمی، کاربن ڈائی آکسائیڈ، بجلی کی خرابی، اور انکیوبیٹر میں ناکافی درجہ حرارت جیسے غیر معمولی واقعات کو روکنے کے لیے اسے ہر روز چیک کرنا بہتر ہے۔ بار بار تجربات سے ہونے والے زیادہ درد سے بچنے کے لیے ان حادثات کو بروقت حل کرنا بھی ضروری ہے۔ .
اچھے خلیات کو وقت پر بیج کیا جانا چاہئے
خلیوں کو بیچوں میں منتقل کیا جاتا ہے تاکہ یہاں تک کہ اگر ایک بیچ فیل ہو جائے تو اسپیئر موجود ہے۔ یہ مؤخر الذکر کی طرح اوسط شخص کے لئے آسان نہیں ہوسکتا ہے۔ لیکن یہ میرے خون کا سبق ہے۔ ایک بار جب خلیے آلودہ ہو گئے تو پوری فوج کا صفایا ہو گیا۔ اس وقت، مجھے افسوس ہے کہ میں نے بیج کی حفاظت نہیں کی۔
ہر خلیے کی اپنی خصوصیات ہیں اور ان کے ساتھ مختلف سلوک کیا جانا چاہیے۔
خلیات انسانوں کی طرح ہیں، اور مختلف خلیات مختلف ثقافتی خصوصیات ہیں. کاشت کے عمل میں احتیاط برتیں۔ مختلف سیل لائنیں مختلف میڈیا اور سیرم کا استعمال کرتی ہیں۔
مثال کے طور پر، ہموار پٹھوں کے خلیات جو میں اٹھاتا ہوں بہت فعال ہیں اور زندہ رہنا پسند کرتے ہیں۔ 2-3 دنوں میں بڑی آبادی ہو جائے گی، اور مجھے کھانا پینا زیادہ پسند نہیں ہے۔ یہ واقعی پرورش کے لیے بہترین بچہ ہے۔ Endothelial خلیات اور ہموار پٹھوں کے خلیات ایک جیسی شخصیت رکھتے ہیں، لیکن وہ بہت غیر صحت بخش اور میلے ہوتے ہیں۔ ان میں بہت سے خفیہ خلیے ہوتے ہیں، اس لیے انہیں تبدیل کرنے اور بار بار دھونے کی ضرورت ہے۔ RAW264.7 سیل بھی بہت خوش مزاج اور کھانے کے قابل ہیں۔ انہیں اکثر کھانا کھلانا ضروری ہے۔ سر درد یہ ہے کہ خلیے آسانی سے متحرک ہو جاتے ہیں۔ یہ اچھی بات ہے کہ جس بوتل اور ماحول میں ان کی ثقافت ہے وہ اینڈوٹوکسین سے پاک ہے، لیکن ایک ماں کے طور پر ان کو مطمئن کرنا میرے لیے مشکل ہے۔
تربیت سے پہلے کام کی تیاری
بشمول استعمال کی اشیاء کی ہینڈلنگ، ری ایجنٹس کی ترتیب، بانجھ پن کی جانچ وغیرہ۔
شیشے کے برتنوں کی صفائی۔ شیشے کے برتن (سیل کی بوتل، غذائیت کے محلول پر مشتمل بوتل، پینسلین کی چھوٹی بوتل وغیرہ) کے لیے، پہلے واشنگ پاؤڈر کو صاف کرنے کے لیے استعمال کریں (مردہ کونوں پر توجہ دیں)، اور پھر دھولیں۔ تیزابی محلول میں 24 گھنٹے سے زیادہ بھگو دیں، پھر بقیہ تیزابی محلول کو دور کرنے کے لیے 10 بار صاف پانی سے دھو لیں۔ کلی کے دوران بوتلیں وغیرہ کو زور سے ہلائیں۔ پھر اسے 24 گھنٹے کے لیے دوگنا پانی میں بھگو دیں۔ خشک ہونے کے بعد اسے لپیٹ کر 160 ڈگری پر 2 گھنٹے تک خشک کریں۔
ریجنٹ کنفیگریشن۔ سیل کلچر کے لیے مائع کے طور پر، عام طور پر، ڈبل آست پانی سے زیادہ استعمال کیا جا سکتا ہے۔ اور pH قدر کی ایڈجسٹمنٹ پر توجہ دیں۔
بانجھ پن کی جانچ۔ بنیادی طور پر فلٹر سٹرلائزیشن کا استعمال کریں: جیسے ٹرپسن، اینٹی بائیوٹکس، جی-418 محلول، مختلف میڈیا، سوڈیم پائروویٹ، گلوٹامین، وغیرہ۔ کچھ کو آٹوکلیو کیا جا سکتا ہے: PBS، D-Hank's، وغیرہ۔
ریجنٹس کو ایلی کوٹس میں محفوظ کیا جاتا ہے۔
بشمول غذائیت کا محلول، پینکریٹین، سیرم وغیرہ۔
سیرم خاص طور پر اہم ہے۔ سیرم کو -20 ڈگری پر ذخیرہ کیا جانا چاہیے۔ اگر ایک وقت میں ایک بوتل استعمال نہیں کی جا سکتی ہے، تو 40-50ml کو جراثیم سے پاک ایسڈ سے علاج شدہ بوتلوں میں بھیجا جا سکتا ہے، یا پنسلین کی بوتلوں میں بھی ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔ عام طور پر، کارخانہ دار کی طرف سے فراہم کردہ سیرم جراثیم سے پاک ہوتا ہے اور اسے جراثیم سے پاک فلٹریشن کی ضرورت نہیں ہوتی ہے۔ اگر سیرم میں بہت زیادہ معلق مادہ پایا جاتا ہے، تو سیرم کو درمیانے درجے میں شامل کیا جا سکتا ہے اور ایک ساتھ فلٹر کیا جا سکتا ہے، اور سیرم کو براہ راست فلٹر نہیں کیا جانا چاہیے۔ (عام حالات میں سیل کلچر پر کوئی اثر نہیں ہوتا)
بوتل میں بند سیرم کو آہستہ آہستہ پگھلانا ضروری ہے: 4 ڈگری ریفریجریٹر کو مکمل طور پر تحلیل کیا جاتا ہے اور پھر پیکیجنگ میں تقسیم کیا جاتا ہے۔ تحلیل کے عمل کے دوران، درجہ حرارت اور ساخت کو یکساں بنانے اور بارش کے واقعات کو کم کرنے کے لیے اسے باقاعدگی سے ہلانا چاہیے (ہوا کے بلبلوں کا سبب نہ بنیں)۔ -20 ڈگری سے 37 ڈگری تک براہ راست پگھلائیں نہیں، کیونکہ درجہ حرارت بہت زیادہ بدل جاتا ہے، جو آسانی سے پروٹین جمنے اور بارش کا سبب بن سکتا ہے۔
ہیٹ غیر فعال ہونے سے مراد مکمل طور پر پگھلے ہوئے سیرم کو 56 ڈگری پر 30 منٹ تک گرم کرنا ہے۔ پانی کے غسل کے 56 ڈگری تک بڑھنے کے بعد، سیرم کو اندر ڈالیں، درجہ حرارت کے 56 ڈگری تک بڑھنے کا انتظار کریں اور وقت گنیں، عام طور پر اسے ہر 5 منٹ میں ایک بار یکساں طور پر ہلائیں۔ اس گرمی کے علاج کا مقصد سیرم میں تکمیلی اجزاء کو غیر فعال کرنا ہے۔ جب تک ضروری نہ ہو، یہ گرمی کا علاج عام طور پر انجام نہیں دیا جاتا ہے کیونکہ یہ تلچھٹ میں نمایاں اضافہ کا سبب بنے گا اور سیرم کے معیار کو متاثر کرے گا۔ خلیوں پر سیرم (مختلف بیچوں سمیت) کو تبدیل کرنے کے اثر پر توجہ دیں۔
بانجھ پن کا مضبوط احساس
تجربے سے پہلے، الٹرا کلین بینچ کو 30 منٹ کے لیے UV لائٹ شعاع ریزی کے ذریعے جراثیم سے پاک کیا گیا تھا، اسپٹک آپریشن کی سطح کو 70 فیصد ایتھنول سے صاف کیا گیا تھا، اور تجرباتی آپریشن شروع ہونے سے چند منٹ قبل الٹرا کلین بینچ کے پنکھے کو آن کیا گیا تھا۔ .
لیبارٹری سیل کلچر کے بارے میں مزید جاننے کے لیے، براہ کرم کلک کریں: http://www.shjasw.com/
