نیوکلیک ایسڈ کا پتہ لگانے کا اصول

نیوکلیک ایسڈ کا پتہ لگانے کا اصول

اس کٹ کو نئے کورونا وائرس (2019-این سی او وی) جین ری کمبینینٹ اینٹی جن کے ساتھ پہلے سے کوٹیڈ کیا گیا ہے

پلیٹ، اور انزائم کے لیبل والے اینٹی ہیومن آئی جی اے مونوکلونل اینٹی باڈی کے ساتھ مارکر کے طور پر، ایلیسا بالواسطہ طریقہ استعمال کرتے ہوئے

انسانی سیرم میں ناول کورونا وائرس (2019-این سی او وی) آئی جی اے اینٹی باڈی کا معیاری طور پر پتہ لگانے کے لئے۔

سبسٹریٹ ٹی ایم بی میں ری ایکشن کمپلیکس شامل ہونے کے بعد رد عمل ختم کر دیا گیا اور ہر کنویں کے او ڈی کی پیمائش 450 این ایم کے طول موج پر کی گئی۔

او ڈی ویلیو کا سائز اینٹی باڈی کے مواد کے متناسب ہوتا ہے جس کا پتہ لگایا جائے۔

【نمونہ ضروریات】

1. تازہ خون کے نمونے استعمال کریں۔ اگر آپ کو انہیں بچانے کی ضرورت ہے، تو آپ انہیں 2~8° سی پر 48 گھنٹے کے لئے فریج میں رکھ سکتے ہیں یا انہیں -20° سی پر منجمد کرسکتے ہیں۔

جینا. بار بار منجمد ہونے اور پگھلنے سے گریز کریں (3 گنا سے زیادہ)۔

2۔ حل پذیر، ابر آلود یا چربی والے نمونوں کے استعمال سے گریز کریں۔

3۔ اگر نمونے کو لے جانے کی ضرورت ہے تو اسے 2~8سی ° سی یا منجمد رکھا جائے۔

4. نمونے میں اینٹی کواگلنٹس یا حفاظتی ایجنٹیا محافظشامل کرنے سے گریز کریں، تاکہ ٹیسٹ کے نتائج متاثر نہ ہوں۔

【 معائنہ کا طریقہ】

1۔ کٹ کو ریفریجریٹر سے باہر نکالیں اور کمرے کے درجہ حرارت (15 منٹ) تک مساوی کریں، پہلے سے کوٹیڈ رد عمل کو ہٹا دیں

سوار کیا جائے اور کھول دیا جائے۔ مرتکز دھونے کے محلول کو استعمال کے لئے ڈسٹلڈ یا ڈیونائزڈ پانی کے ساتھ 1:30 کو پتلا کریں۔

2۔ نمونہ پتلا کرنا: نمونے کو پتلا کریں جس کی جانچ نمونہ 1:100 (نمونہ 2یو ایل--- نمونہ کے ساتھ کی جائے

ڈلونٹ 200یو ایل)، اچھی طرح مکس کریں (یا پلیٹ میں براہ راست اچھی طرح پتلا کریں، یعنی پلیٹ میں 200ال نمونہ ڈلورنٹ اچھی طرح شامل کریں، 2ال نمونہ شامل کریں اور اسے مکس کریں)۔

3. نمونہ شامل کریں: پلیٹ کے کنویں میں پتلا نمونہ 100یو ایل شامل کریں (اگر اسے پلیٹ کے کنویں میں پتلا کیا جائے تو اس مرحلے کی ضرورت نہیں ہے

قدم). ہر کنویں میں منفی اور مثبت کنٹرول (100یو ایل/ویل، ان ڈیولپڈ) سیٹ کریں، اور ایک خالی کنٹرول اچھی طرح سیٹ کریں

(100یو ایل نمونہ شامل کریں)، ہلائیں اور مکس کریں۔

4. انکیوبیشن: 37° سی پر 30 منٹ۔ کنویں میں مائع کو ہلائیں، پلیٹ کو دھونے کے محلول سے 3 بار دھوئیں، ہر بار

30 سیکنڈ تک رہنے کے بعد، سوراخ میں مائع کو ہلائیں، اور جذب کرنے والے کاغذ پر خشک تھپتھپائیں۔

5. انزائم کنجوگیٹ شامل کریں: 2 قطرے (یا 100یو ایل) فی کنواں، اچھی طرح مکس کریں اور 20 منٹ کے لئے 37° سی پر انکیوبیٹ کریں۔ اوپر سے ٣ گنا دھوئیں اور خشک پیٹ کریں۔

6. رنگ کی ترقی: ہر کنویں میں رنگ ڈویلپر اے اور بی (یا 50یو ایل ہر ایک) کا ایک قطرہ شامل کریں، ہلائیں اور اچھی طرح مکس کریں، 37 پر سیٹ کریں

10 منٹ کے لئے انکیوبیٹ کریں۔