سیرم کی بوتل کا اطلاق
سیرم کی بوتل کم نکالنے والے بوروسیلیکیٹ شیشے سے بنی ہے، اور بے رنگ صاف بوتل USP قسم I اور ASTM E 438 قسم I سٹینڈرڈ کلاس A کی ضروریات کو پورا کرتی ہے۔ اسے 121 ڈگری پر 20 منٹ کے لیے آٹوکلیو کیا جا سکتا ہے، اور اسے 125 ملی لیٹر میں تقسیم کیا جا سکتا ہے۔ حجم کے مطابق 250ml، 500ml، 1L، 2L۔
سیرم کی بوتل سیرم کو ذخیرہ کرنے کے لیے ایک کنٹینر ہے، جو عام طور پر انجیکشن سٹریچ اڑانے کے عمل کے ذریعے پی ای ٹی مواد سے بنا ہوتا ہے۔ میڈیم سیل کی نشوونما کے لیے ضروری غذائیت ہے۔ اس کے ماخذ کے مطابق، اسے مصنوعی میڈیم اور قدرتی میڈیم میں تقسیم کیا گیا ہے، دونوں کو سیرم کی بوتلوں میں محفوظ کیا جا سکتا ہے۔
سیرم کی بوتل
قدرتی ذریعہ:
سب سے زیادہ استعمال ہونے والا قدرتی میڈیم سیرم ہے، بنیادی طور پر بچھڑے کا سیرم۔ سیرم میں خلیوں کی نشوونما کے متعدد عوامل، آسنجن کو فروغ دینے والے عوامل اور ان کے کثیر فعال مادے ہوتے ہیں۔ مصنوعی میڈیم کے ساتھ مل کر، خلیات پھیل سکتے ہیں اور آسانی سے بڑھ سکتے ہیں۔ سیرم کو خصوصی سیرم کی بوتلوں میں -5 ڈگری سے -20 ڈگری پر ذخیرہ کرنے کی ضرورت ہے۔
مصنوعی میڈیم:
مصنوعی میڈیم سختی سے خلیات کو درکار مادوں کی قسم اور مقدار کے مطابق تیار کیا جاتا ہے۔ کئی اقسام اور معلوم اجزاء ہیں، جو تجرباتی حالات کے کنٹرول میں سہولت فراہم کرتے ہیں۔ کاربوہائیڈریٹس، امینو ایسڈز، لپڈس، غیر نامیاتی نمکیات، وٹامنز، ٹریس عناصر اور سیل کی نشوونما کے عوامل پر مشتمل ہے۔ تاہم، قدرتی ذریعہ کے مقابلے میں، کچھ قدرتی نامعلوم اجزاء کو معلوم کیمیائی اجزاء سے تبدیل نہیں کیا جا سکتا۔ لہٰذا، سیل کلچر میں استعمال ہونے والے بنیادی مصنوعی میڈیم کو مصنوعی ثقافت پر قابو پانے کے لیے قدرتی درمیانے درجے کے اجزاء کی ایک خاص مقدار بھی شامل کرنی چاہیے۔ ناکافی بنیاد، سب سے زیادہ عام مشق بچھڑے کے سیرم کو شامل کرنا ہے۔
سیرم کی بوتل کی شکل مربع ہے، پکڑنے میں آسان ہے، زیادہ تر تیزاب اور الکلی کے سنکنرن کے خلاف مزاحم ہے، جھنجھٹ کا درجہ حرارت -70 ڈگری ہے، اور اس میں اب بھی -30 ڈگری پر ایک خاص سختی ہے۔ یہ ایک اچھا پیکیجنگ کنٹینر ہے، چاہے یہ قدرتی میڈیم ہو یا مصنوعی ثقافت۔ سیرم کی بوتلوں میں ذخیرہ کیا جا سکتا ہے.
انسانی نال کے خون کے اینڈوتھیلیل پروجینیٹر سیلز کی تنہائی، ثقافت اور شناخت کے لیے اور بہتر منجمد پگھلنے کے طریقے کے ذریعے سیلولر ویسکولر سکیفولڈز کے قیام کے لیے
انسانی نال کے خون سے الگ تھلگ اور کلچر شدہ اینڈوتھیلیل پروجینیٹر سیلز کی فزیبلٹی اور کلینیکل ایپلی کیشن ویلیو کو دریافت کرنا۔
طریقے: بینگبو میڈیکل کالج کے پہلے ملحقہ اسپتال کے شعبہ امراض نسواں اور امراض نسواں میں مکمل مدتی سیزرین سیکشن سے گزرنے والے جنین کے نال خون کو جمع کیا گیا، اسے سیرم کی بوتل میں رکھا گیا جس میں 50U/ml ہیپرین موجود تھی۔ سیپٹک حالات میں، 4 ڈگری آئس باکس میں ذخیرہ کیا جاتا ہے، اور کلچر روم میں خلیات میں منتقل کیا جاتا ہے، نال کے خون کے مونو نیوکلیئر خلیات کثافت گریڈینٹ سینٹرفیوگریشن کے ذریعے حاصل کیے گئے تھے۔ حاصل کردہ mononuclear خلیات کو دو حصوں میں تقسیم کیا گیا تھا، اور fetal calf serum M199 میڈیم (FCS-M199) اور آٹولوگس سیرم M199 میڈیم (AS-M199) کو شامل کیا گیا تھا۔ اور انہیں ثقافتی پکوانوں میں انسانی فائبرونیکٹین (HFN) کے ساتھ اور اس کے بغیر بیج کیا گیا تھا (جس کا نشان بالترتیب: F(0), F(1), A(0), A(1)) تھا۔ وٹرو انڈکشن میں تفریق اور توسیع کی گئی۔
پورے شامل کرنے اور تفریق کے عمل کے دوران پیروکار خلیوں کی شکلیاتی تبدیلیوں کا مشاہدہ کیا گیا تھا، اور ان کی شناخت مختلف زاویوں سے کی گئی تھی جو متعلقہ تکنیکوں جیسے امیونو ہسٹو کیمسٹری، امیونو فلوروسینس اور فلو سائٹومیٹری کے ساتھ مل کر کی گئی تھی۔
نتائج: کلچر کے 12 دن کے بعد، ہڈی کے خون کے مونو نیوکلیئر خلیے چپکنے لگے۔ 3d کے بعد، تکلی کی شکل نظر آنا شروع ہوئی، اور پھر دھیرے دھیرے منسلک خلیوں کی تعداد میں اضافہ ہوا اور آہستہ آہستہ تکلی کی شکل اختیار کر گئی۔ جب ایک ہفتے تک مہذب کیا جاتا ہے، تو ایک عام کالونی بنتی ہے جس کے ارد گرد تکلی کے خلیات ہوتے ہیں اور مرکز میں گول خلیات ہوتے ہیں۔ جب خلیات کو 14 دنوں کے لیے کلچر کیا گیا تو، آپس میں جڑے ہوئے سیل کلسٹرز آہستہ آہستہ جڑ گئے اور ایک نیٹ ورک جیسا ڈھانچہ تشکیل دیا۔ ایک ہی وقت میں، ثقافت کے وقت کے مسلسل اضافے کے ساتھ، لمبے تکلے کے خلیے بھی آہستہ آہستہ چھوٹے ہونے لگے، اور ایک عام ہموار پتھر کی طرح کی تبدیلی دکھائی دی۔
منسلک خلیوں کو ایک ہفتے تک کلچر کیا گیا اور یہ دیکھا گیا کہ انسانی فائبرونیکٹین والے میڈیم میں خلیوں کی تعداد انسانی فائبرونیکٹین کے بغیر خلیوں کی نسبت نمایاں طور پر زیادہ تھی اور دو مختلف میڈیم میں خلیوں کی تعداد میں کوئی خاص تبدیلی نہیں آئی۔